Erhöhte Sensitivität der Multi-Color-Durchflusszytometrie

Krome Orange von Beckman Coulter

  • Anregungskurve des Farbstoffs Krome Orange Anregungskurve des Farbstoffs Krome Orange

Beckman Coulter, Inc. führt den neuartigen organischen Fluoreszenzfarbstoff Krome Orange ein, der von violettem Licht angeregt wird. Er erweitert die Palette der verfügbaren Optionen sowie die Sensitivitätsgrenzen von Farbstoffen für violette Laser. Gängige Gating-Marker lassen sich problemlos auf dieses Fluorochrom übertragen und machen damit andere Kanäle für die Verwendung seltenerer Marker frei, sodass vielseitigere Durchflusszytometrie-Anwendungen mit 10 Farben möglich sind.

Die Anregungs- und Emissionsmaxima von Krome Orange liegen bei 398 nm bzw. 528 nm, und der Farbstoff liefert ein helleres Signal als Pacific Orange*-Konjugate bei äquivalenten spektralen Überlappungen in angrenzende Kanäle. Krome Orange ist mindestens so hell wie V500 und kann mehr als die doppelte Separation von Zellpopulationen erzielen wie Pacific Orange-Konjugate, wobei die Kompensation gegen Pacific Blue* geringer ist.

Krome Orange-Konjugate erreichen ihre optimale Leistung in violettem Laserlicht mit einem 550/40 Bandpassfilter (der Standard-FL10-Kanal bei Durchflusszytometern). Mit einem 488 nm-Laser dagegen lässt sich keine Anregung detektieren. Die initiale Freisetzung von Krome Orange umfasst Konjugate an Human-CD45 und -CD4, während sich die Palette der Human- und Maus-Targets im Zuge der weiteren Entwicklung noch verbreitern wird.



„Mit dem neuen Farbstoff Krome Orange können Wissenschaftler die Sensitivität für schwache Fluoreszenzsignale erhöhen und bei Zytometrieexperimenten mit mehreren Farbstoffen eine größere Flexibilität erzielen“, erklärte Brad Calvin, Vizepräsident und General Manager des Cytometry Business Centre von Beckman Coulter. „Die Entwicklung dieses neuen Farbstoffs unterstreicht Beckman Coulters Engagement für die Weiterentwicklung mehrfarbiger Zellanalysetechnologien.“

 

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